Application of Nanoparticles to the Analysis of Biomarkers
In this work a well established analytical format, the optical ELISA test, was combined with a novel concept of controlled gold nanoparticle (AuNP) bioconjugation procedures aiming to improve the analytical performances without increasing significantly the complexity of the procedure. AuNPs have been adopted as multi-enzyme carriers in the enzyme-based immunoassay for the analysis of CA15-3 biomarker, which generated an amplified optical read-out while keeping low background signals.
In addition to the standard spectrophotometric detection format, normally adopted in ELISA tests, an electrochemical detection has also been developed. This consisted on measuring the current signal generated applying a fixed potential during the reduction of the enzyme substrate, oxidized by the Horseradish Peroxidase (HRP) signaling enzyme in the last step of the ELISA. Screen-printed electrodes with silver pseudo-reference, carbon auxiliary and carbon working electrodes all-built-in, were used for the current measurements in a voltammetric cell. The current signal resulted directly proportional to the antigen concentration (CA 15-3) and hence it can be used as an alternative tool to quantify unknown samples.
The presence of AuNPs confirmed the higher assay sensitivity due to the signal enhancement, already obtained with the optical detection.
This simple concept of using AuNPs as effective signal enhancer could be easily exploited to improve the analytical performances of commercially available ELISA tests, especially those requiring high accuracy to facilitate physicians in deciding the appropriate medical treatment.
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Informazioni tesi
Autore: | Federico Airò |
Tipo: | Laurea II ciclo (magistrale o specialistica) |
Anno: | 2009-10 |
Università: | Università degli Studi di Milano - Bicocca |
Facoltà: | Scienze Matematiche, Fisiche e Naturali |
Corso: | Biotecnologie industriali |
Relatore: | Francesco Peri |
Lingua: | Inglese |
Num. pagine: | 97 |
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