Metodiche di ingegneria genomica con particolare riguardo al sistema CRISPR-Cas9: possibili applicazioni

2 1.0 Introduzione L'innovazione tecnologica nelle scienze biologiche ha permesso il conseguimento di importanti risultati nel giro di breve tempo. In particolare, il sequenziamento di interi genomi ha provveduto a fornire (letteralmente) le basi per lo sviluppo di metodiche finalizzate alla modifica dei genomi, offrendo così la possibilità di inserire determinate caratteristiche in organismi che probabilmente non avrebbero mai acquisito con l'evoluzione o di rimuoverne quelle preesistenti. In questo lavoro vengono presentate e messe a confronto le metodiche con cui tale modifica genomica può avvenire ed i loro rispettivi limiti, con particolare attenzione al recente e promettente sistema CRISPR-Cas9. 1.1 Modifica dei genomi La modifica genomica è una branca della biologia molecolare di recente applicazione in cui il DNA di un organismo viene manipolato artificialmente per alterarne delle specifiche caratteristiche. Si possono definire due grandi modalità finalizzate a modificare il DNA di un organismo: 1) stimolare l'insorgenza di mutazioni in siti specifici senza introdurre sequenze nucleotidiche dall'esterno;