Distruzione selettiva di cellule linfomatose CD22+ mediante targeting molecolare della saporina-S6

  
PBS phosphate-buffered saline (soluzione 
fisiologica tamponata) 
PE Esotossina di Pseudomonas 
PE38 porzione di PE del peso molecolare di 38 
kDa 
PE40 porzione di PE del peso molecolare di 40 
kDa 
PEG Polietilenglicole 
REAL Revised European-American Lymphoma 
RIP Ribosome-Inactivating Protein 
RIT Radioimmunoterapia 
RPMI mezzo di coltura sintetico del Roswell Park 
Memorial Institute 
scFV single chain Fv 
SDS sodio dodecil-solfato 
SO6 Saporina-S6 
SPDP N-succinimidil-3-(2-piridilditio)propionato 
TCA acido tricloroacetico 
TIL Tumor Infiltrating Lymphoyites 
TMV Virus del mosaico del tabacco. 
TNF Tumor Necrosis Factor 
VLS vascular leak syndrome (sindrome da 
aumentata permeabilità vascolare) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PAROLE CHIAVE 
 
Immunotossine 
Immunoterapia 
Ribosome-Inactivating Protein (RIP) 
Epratuzumab (hLL2) 
CD22 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
INTRODUZIONE 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
INTRODUZIONE 
 3
LINFOMI 
CLASSIFICAZIONE 
I linfomi sono neoplasie solide di derivazione linfocitaria che rappresentano il 3,6% 
di tutte le nuove diagnosi di tumore. Gli organi maggiormente interessati sono i 
linfonodi, ma le cellule tumorali possono trasferirsi in altri loci attraverso i vasi 
linfatici e/o il sangue, localizzandosi in altri linfonodi o anche in organi extralinfatici. 
Qualora si trovino cellule linfomatose a livello del sangue periferico può essere 
impossibile distinguere un linfoma da una leucemia e si parla in questo caso di 
linfoma leucemizzato. Si ha un linfoma extralinfonodale, invece, se la sua origine è 
in organi non linfoidi, ma ciò avviene raramente. 
I linfomi sono un gruppo di neoplasie molto eterogeneo e pertanto la loro 
classificazione è  complicata, tuttavia sono storicamente divisi in due grandi gruppi: 
Linfomi di Hodgkin (HL) e Linfomi Non Hodgkin (NHL) 
Il Linfoma di Hodgkin costituisce poco meno dell’1% di tutti i tumori presenti in 
Europa ed in America ed ha una modesta tendenza alla riduzione. È caratterizzato 
dalla presenza di cellule di Reed-Stemberg, appartenenti alla linea linfocitaria, che 
sono le vere e proprie cellule della malattia, affiancate da un gran numero di elementi 
cellulari reattivi. 
Pur potendo svilupparsi a qualsiasi età il Linfoma di Hodgkin presenta una 
distribuzione caratteristica: in Europa ed America del nord ha una distribuzione 
bimodale con un picco tra i 15-39 anni e uno dopo i 60 anni; nelle popolazioni a più 
basso livello socio-economico, invece, il picco di incidenza è nell’età infantile. 
Questo andamento si correla con la distribuzione dell’infezione da virus di Epstein-
Barr (EBV). Al momento si ipotizza che il EBV possa avere un ruolo nella 
trasformazione di Linfociti B in cellule di Reed-Stemberg nei Linfomi di Hodgkin ad 
insorgenza giovanile. 
 
I Linfomi non Hodgkin sono invece una classe molto più eterogenea e di difficile 
classificazione. La classificazione più utilizzata oggi è la R.E.A.L. (Revised 
European American Lymphoma) che distingue i vari gruppi in base alla linea 
originaria e al suo stato maturativo. In questa classificazione sono presenti due grandi 
categorie ognuna divisa in varie sottocategorie (Tabella 1) 
 
INTRODUZIONE 
 
 4 
Tabella 1 
CLASSIFICAZIONE R.E.A.L. DEI LINFOMI NON HODGKIN 
Linfomi a cellule B 
I. Neoplasie dei progenitori B: leucemia/linfoma linfoblastico dei progenitori 
II. Neoplasie dei linfociti B periferici 
a. Leucemia linfatica cronica B/Leucemia prolinfocitica/Linfoma a piccoli linfociti 
b. Linfoma Linfoplasmocitoide /Immunocitoma 
c. Linfoma mantellare 
d. Linfoma delle cellule centro follicolari, follicolare 
e. Linfomi B della zona marginale  
f. Linfoma della zona marginale splenica 
g. Leucemia a cellule capellute 
h. Plasmacitoma/Mieloma multiplo 
i. Linfoma diffuso a grandi cellule B 
j. Linfoma di Burkitt  
k. Linfoma ad alto grado B, tipo Burkitt 
 
Neoplasie dei linfociti T e delle cellule NK 
I. Neoplasie dei progenitori T: leucemia/linfoma linfoblastico dei progenitori T 
II. Neoplasie dei linfociti T periferici e delle NK 
a. Leucemia linfatica cronica T/leucemia prolinfocitica 
b. Leucemia dei grandi linfociti granulati 
c. Micosi fungoide/sindrome di Sezary 
d. Linfomi dei linfociti T periferici, non altrimenti specificati 
e. Linfoma angioimmunoblastico T  
f. Linfoma angiocentrico  
g. Linfoma intestinale delle clelule T  
h. Linfoma/leucemia T dell'adulto  
i. Linfoma anaplastico a grandi cellule 
j. Linfoma anaplastico a grandi cellule, tipo Hodgkin  
 
Molto importante è identificare lo stadio del linfoma per utilizzare la terapia corretta 
e poter prevedere il decorso della malattia (Tabella 2). Questa suddivisione permette, 
infatti, di identificare il rischio che la malattia progredisca o dia origine a una 
recidiva. Più lo stadio è alto, più la terapia dovrà essere aggressiva.  
 
 
 
 
INTRODUZIONE 
 5
Tabella 2. Stadiazione dei linfomi 
 
Stadio Sedi interessate
I 
Coinvolgimento di una sola regione linfatica; coinvolgimento limitato  di
un singolo organo o sito extralinfatico.
II
Coinvolgimento di due o più regioni linfatiche dallo stesso lato del
diaframma, oppure interessamento localizzato di un solo organo o sito
extralinfatico assieme all'interessamento di una o più sedi linfatiche dallo
stesso lato del diaframma.
III
Impegno di più regioni linfatiche sopra e sotto il diaframma, che può
essere accompagnato da interessamento localizzato di un organo o sito
extralinfatico, o della milza o di entrambi.
IV
Coinvolgimento diffuso o disseminato di uno o più organi o siti
extralinfatici con o senza coinvolgimento di sedi linfatiche.
Stadiazione dei linfomi
 
 
La classificazione istologica dei linfomi non si correla con lo sviluppo clinico della 
malattia, per questo motivo i linfomi non Hodgkin sono stati raggruppati in quattro 
categorie a crescente malignità in modo da potervi associare la terapia adeguata: 
 
• Linfomi indolenti o a basso grado di malignità 
o Linfomi dei linfociti B: leucemia linfatica cronica/linfoma a piccoli linfociti; 
linfoma linfoplasmocitoide; linfomi delle cellule centrofollicolari, follicolare (a 
piccole cellule, misto); linfomi della zona marginale; leucemia a cellule capellute; 
plasmocitoma/mieloma;  
o Linfomi dei linfociti T: leucemia dei grandi linfociti granulati; linfoma/leucemia T 
dell'adulto; micosi fungoide/sindrome di Sézary  
• Linfomi con malignità o aggressività moderata 
o Linfomi dei linfociti B: leucemia prolinfocitica; linfomi mantellari; linfomi delle 
cellule centrofollicolari, follicolare a grandi cellule  
o Linfomi dei linfociti T: leucemia linfatica cronica; leucemia prolinfocitica; linfoma 
leucemia T dell'adulto (cronica); linfoma angiocentrico; linfoma 
angioimmunoblastico  
• Linfomi aggressivi  
o Linfomi dei linfociti B: Linfomi a grandi cellule B  
o Linfomi dei linfociti T: Linfomi dei linfociti T periferici non specificati; linfoma T 
intestinale; linfoma a grandi cellule anaplastico  
• Linfomi notevolmente aggressivi 
o Linfomi dei linfociti B: linfoma/leucemia dei precursori B; linfoma di Burkitt; 
linfoma B ad alto grado, tipo Burkitt  
o Linfomi dei linfociti T: linfoma/leucemia dei precursori T; linfoma/leucemia T 
dell'adulto (acuta) 
 
INTRODUZIONE 
 
 6 
La malignità clinica si correla con la risposta della malattia alle terapie convenzionali 
quali chemioterapia e radioterapia. Infatti i linfomi più aggressivi, avendo un ritmo 
più alto di duplicazione, sono più suscettibili al trattamento, e possono essere guariti 
almeno nella metà dei casi; quelli meno aggressivi, invece, sono generalmente 
ritenuti incurabili ma permettono la vita per diversi anni anche in assenza di sintomi.   
 
TERAPIA DEI LINFOMI 
Il trattamento dei linfomi dipende da molti fattori tra cui: il tipo di malattia, il suo 
stadio, la sua localizzazione, la sua malignità e l’età e le condizioni generali del 
paziente. In generale ci sono cinque opzioni terapeutiche per il linfoma 
• Chemioterapia 
• Radioterapia 
• Trapianto di cellule staminali  
• Immunoterapia 
• Chirurgia 
 
CHEMIOTERAPIA 
La chemioterapia utilizza farmaci in grado di uccidere più velocemente cellule in 
rapida proliferazione, come sono quelle tumorali, rispetto a quelle “normali” 
dell’organismo. Tuttavia questa terapia ha forti effetti collaterali dovuti all’uccisione 
delle cellule che naturalmente si dividono rapidamente, che limitano la dose massima 
somministrabile. Inoltre le cellule tumorali possono sviluppare una resistenza agli 
agenti chemioterapici bloccando il loro meccanismo di azione o facilitando la loro 
espulsione dalla cellula prima che possano agire. 
Ci sono molte classi di chemioterapici che agiscono ognuna con un meccanismo di 
azione diverso. 
I chemioterapici possono essere somministrati come agente singolo oppure possono 
essere associati in regimi di polichemioterapia, in questo modo si evita la resistenza e 
si aumenta l’efficacia del trattamento. Recentemente si sono resi disponibili nuovi 
analoghi di nucleosidi che hanno dimostrato buona attività nei linfomi non Hodgkin 
come singolo agente: la fludarabina-fosfato, la cladribina e la pentostatina. 
 
INTRODUZIONE 
 7
RADIOTERAPIA 
La radioterapia consiste nell’irradiazione del tumore con radiazioni ionizzanti al fine 
di indurre una danno cellulare e la morte della cellula. Le radiazioni ionizzanti 
interagendo con l’acqua provocano la formazione di una gran quantità di radicali 
liberi che, attraverso più meccanismi, riescono ad danneggiare la cellula e in 
particolar modo il suo DNA. Le cellule cancerose sono spesso difettose nei 
meccanismi di riparazione del DNA, per questo motivo si fanno cicli di radiazioni ad 
intervalli di tempo sufficienti a riparare i danni da parte delle cellule normali, ma non 
per quelle cancerose: il risultato è che i danni si accumulano e la cellula tumorale 
muore. 
Possono essere utilizzati diversi tipi di radiazione dai raggi x e γ alle particelle α e β 
o altre particelle cariche (terapia con Adroni). La differenza sta nel fatto che 
l’utilizzo di particelle permette un rilascio di energia focalizzato sulla massa 
tumorale, creando minori problemi al resto dell’organismo. 
 
AUTOTRAPIANTO DI CELLULE STAMINALI EMOPOIETICHE 
Questo trattamento viene utilizzato per i pazienti resistenti a chemio/radioterapia. 
Prima di tutto vengono mobilizzate le cellule staminali del midollo osseo in modo da 
aumentarne la concentrazione nel sangue periferico da cui, in seguito, vengono 
prelevate e conservate. Si procede quindi al trattamento del paziente con dosi più alte 
di chemio/radioterapia sufficienti ad uccidere le cellule tumorali resistenti. Questo, 
però, ha come effetto collaterale l’uccisione delle cellule del midollo osseo; per 
ovviare a questo problema, le cellule staminali vengono reintrodotte nel paziente 
dove, opportunamente stimolate da fattori di crescita, andranno a localizzarsi nella 
milza dando origine a colonie da cui matureranno tutte le cellule del sistema 
emopoietico. In questo modo si riesce a superare la tossicità ematologica. 
 
CHIRURGIA 
La chirurgia trova un’applicazione molto limitata in questo campo, e può essere 
presa in considerazione solo per eliminare i linfomi extranodali dalla loro sede, 
qualora sia necessario.  
 
INTRODUZIONE 
 
 8 
LIMITAZIONI DELLA TERAPIA CONVENZIONALE IN NHL 
I linfomi non Hodgkin indolenti rispondono solo debolmente alla chemioterapia e 
alla radioterapia a causa della loro lenta progressione, per questo motivo spesso i 
pazienti affetti da tale malattia non vengono curati fino alla comparsa di sintomi ( 
strategia del “watch and wait”) 
Per quanto riguarda i linfomi non Hodgkin aggressivi, grazie alla chemioterapia e 
alla radioterapia quasi il 50% dei pazienti riesce ad essere curato, ma queste terapie 
presentano pesanti effetti collaterali dovuti alla scarsa selettività di azione e 
all’insorgenza di resistenza e di neoplasie secondarie. Per questi motivi è forte lo 
stimolo a ricercare alternative terapeutiche più efficaci e sopportabili dal paziente 
affetto da linfoma. 
 
(Informazione prese da: 
Fisher, 2003 
www.linfoma.it a cura della Divisione Universitaria di Ematologia di Torino 
www.oncologychannel.com 
web.tiscali.it/ematologia/)