Ricerca di Anticorpi anti-piastrine in pazienti politrasfusi. Esperienza del Servizio di Immunoematologia e Medicina Trasfusionale (SIMT) del Policlinico Tor Vergata

Nel corso degli anni sono state proposte varie metodiche da utilizzare per la ricerca di eventuali anticorpi diretti verso le piastrine presenti nel siero dei pazienti, siano essi auto che alloanticorpi.
Tra le varie tecniche impiegate a tal proposito ricordiamo la metodica di Dixon5, modificata poi da Kelton, la quale non risulta attualmente valida per la ricerca di autoanticorpi poiché altamente aspecifica e soprattutto risulta essere una determinazione indiretta degli anticorpi, infatti si basa sulla quantizzazione delle IgG di membrana presenti sulle piastrine.
La metodica descrive una inibizione della lisi complemento mediata delle IgG di superficie delle piastrine e prevede una preparazione
manuale dei vari reagenti da usare nelle fasi del processo.
I campioni di piastrine da far interagire con il siero o plasma del paziente da testare si ottengono mediante prelievo venoso in EDTA per prevenire la coagulazione preferibilmente da donatori sani di gruppo 0 POS, e da questi si ha una sospensione purificata
mediante centrifugazione e separazione per gradiente di densità.
Le piastrine vengono lavate cinque volte in soluzione isotonica di EDTA e risospese in soluzione isotonica.