Valutazione di un metodo per la determinazione delle catene leggere libere nel liquido cefalorachidiano

Nel caso in cui l’aumento delle proteine all’interno del liquor sia dovuto alla sintesi intratecale di immunoglobuline di classe G, questo si associa spesso ad una restrizione di eterogeneità che si presenta come un quadro oligoclonale rivelato nella zona gamma delle migrazioni elettroforetiche ad alta risoluzione. Nella zona delle gammaglobuline possono anche essere presenti bande che non corrispondono a delle immunoglobuline, ma che non hanno lo stesso significato diagnostico.

Anche se un quadro oligoclonale non è specifico di Sclerosi Multipla, la sua presenza è largamente utilizzata come complemento di informazione importante per la diagnosi e la sua messa in evidenza è considerata come un test essenziale nel Consenso definito nel 1994 dal “Comitato di Azione Europea Concertata sulla Sclerosi Multipla". Si tratta di un test di conferma nei pazienti che hanno degli episodi clinici di sclerosi multipla e di un test indicativo nei pazienti che hanno avuto soltanto qualche episodio di sclerosi o dei sintomi clinici non conclusivi.

I criteri di selezione proposti da tale Comitato per la rivelazione delle bande oligoclonali sono:
• La tecnica più sensibile e più risolutiva per la rivelazione delle IgG oligoclonali è l’isoelettrofocalizzazione;
• Le IgG oligoclonali devono essere rilevate utilizzando un antisiero specifico;
• Per confermare la sintesi intratecale di IgG, devono essere analizzati in parallelo siero e liquor per distinguere le differenze del profilo di distribuzione delle IgG;
• Per rendere agevole l’interpretazione le concentrazioni di IgG nel siero e nel liquor devono essere uguali;
• Deve essere evitata, se possibile, la concentrazione del CSF.

La tecnica HYDRAGEL 3 & 9 CSF rispetta i suddetti criteri.

La ricerca delle BO tramite IEF può dare origine a 5 profili interpretativi:
Tipo 1: assenza di bande oligoclonali nel liquor e siero
Tipo 2: presenza d bande oligoclonali nel liquor e non nel siero, indicative di sintesi intratecale, come nella Sclerosi Multipla (es.: paziente 3, fig. 3.5)
Tipo 3: presenza di bande oligoclonali identiche nel liquor e nel siero con bande addizionali nel liquor non visibili nel siero e indice di sintesi intratecale
Tipo 4: presenza di bande oligoclonali identiche nel liquor e nel siero -> “mirror pattern” (es.: paziente 2, fig. 3.5)
Tipo 5: presenza di componente monoclonale visibile sia nel siero che nel liquor, per diffusione attraverso la barriera emato-encefalica.

Importante ai fini diagnostici è, invece, l’aumento di un indice: l’Indice di Link; questo deriva dalla misurazione quantitativa di IgG (QIgG) sia nel sangue che nel liquor e di albumina (Qalb): è considerato patologico un valore > 0,7 (Mares et al., 2008). Un incremento di tale indice non è tuttavia indicativo di Sclerosi Multipla, sebbene sia stato riscontrato nel 70-90% dei casi.